
熒光定量PCR儀是一種用于實時監(jiān)測DNA擴增過程的高通量設(shè)備,支持快速檢測、定量分析和多通道熒光信號采集,廣泛應(yīng)用于基因表達研究、病原體檢測和分子診斷等領(lǐng)域。其核心功能包括精準(zhǔn)溫控、多目標(biāo)同步檢測及自動化數(shù)據(jù)分析。
一、工作原理與核心功能
熒光定量PCR(qPCR)技術(shù)通過在擴增過程中實時監(jiān)測熒光信號的變化,結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線或閾值循環(huán)數(shù)(Ct值)對目標(biāo)核酸進行定量。采用96孔板設(shè)計,可同時處理多個樣本,顯著提升檢測效率。其溫控系統(tǒng)通過半導(dǎo)體模塊或帕爾貼元件實現(xiàn)快速升降溫(如0.1℃精度),確保擴增反應(yīng)的高特異性。設(shè)備通常配備4-6個熒光檢測通道,兼容SYBR Green、TaqMan探針等不同熒光標(biāo)記方式,支持多靶標(biāo)檢測。
二、主要應(yīng)用場景
1、基因表達分析:通過相對或絕對定量,研究特定基因在不同條件下的表達水平差異。
2、病原體檢測:快速識別病毒(如新冠病毒)、細菌或真菌的核酸,用于臨床診斷或流行病學(xué)調(diào)查。
3、轉(zhuǎn)基因檢測:定量分析食品或作物中的轉(zhuǎn)基因成分。
4、突變鑒定與SNP分型:結(jié)合探針設(shè)計,檢測單核苷酸多態(tài)性或基因突變。
二、性能與操作特點
1、高通量與靈活性:96孔板適配多層次實驗需求,支持單孔獨立編程,適合大規(guī)模篩查或小樣本研究。
2、靈敏度與線性范圍:可檢測低至單拷貝的核酸,動態(tài)范圍通??缭?0個數(shù)量級。
3、數(shù)據(jù)分析軟件:內(nèi)置軟件自動生成擴增曲線、熔解曲線,并提供閾值設(shè)定、標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合及結(jié)果導(dǎo)出功能,簡化操作流程。
三、使用注意事項
1、避免交叉污染:實驗前需分區(qū)操作(試劑配制、樣本處理、擴增檢測),使用帶濾芯槍頭。
2、反應(yīng)體系優(yōu)化:需根據(jù)引物濃度、模板質(zhì)量調(diào)整反應(yīng)條件,減少非特異性擴增。
3、定期校準(zhǔn):對光路、溫控模塊進行周期性校準(zhǔn),確保數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性。
四、維護與保養(yǎng)
1、清潔與消毒:每次使用后清理孔板槽,避免殘留污染;表面用75%乙醇擦拭。
2、光學(xué)系統(tǒng)維護:定期檢查激發(fā)光源和檢測器性能,防止信號衰減。
3、軟件更新:及時升級控制程序和分析工具,兼容新型熒光染料或?qū)嶒炐枨蟆?/span>
該設(shè)備通過整合高效溫控、多通道檢測及智能化分析,為分子生物學(xué)研究和臨床檢測提供了可靠工具。用戶需結(jié)合實驗?zāi)繕?biāo)合理選擇探針類型、反應(yīng)程序及數(shù)據(jù)分析方法,以充分發(fā)揮其性能優(yōu)勢。