在化學(xué)分析、環(huán)境監(jiān)測(cè)、食品檢測(cè)及生物醫(yī)藥等領(lǐng)域，樣品前處理是消除基質(zhì)干擾、富集目標(biāo)分析物的核心環(huán)節(jié)，而固相萃取技術(shù)因具有操作簡(jiǎn)便、富集效率高、有機(jī)溶劑消耗量少等優(yōu)勢(shì)，已成為目前應(yīng)用最廣泛的樣品前處理方法之一。固相萃取過(guò)程主要包括固相萃取柱活化、樣品上樣、淋洗除雜及目標(biāo)物洗脫四個(gè)關(guān)鍵步驟，每個(gè)步驟均需精準(zhǔn)控制液體的移取體積與速度——若移液精度不足，不僅會(huì)導(dǎo)致活化不充分、目標(biāo)物富集效率下降，還可能因淋洗過(guò)度或洗脫不完全造成分析誤差，影響最終檢測(cè)結(jié)果的可靠性。

移液器作為固相萃取實(shí)驗(yàn)中液體移取的核心工具，其性能直接決定實(shí)驗(yàn)操作的準(zhǔn)確性與重復(fù)性。目前市場(chǎng)上的移液器品牌眾多，但不同產(chǎn)品在精度控制、操作手感及適配性方面存在顯著差異。博清生物科技（南京）有限公司作為專注于實(shí)驗(yàn)室耗材與儀器研發(fā)的企業(yè)，其研發(fā)生產(chǎn)的單道移液器采用了先進(jìn)的活塞密封技術(shù)與精準(zhǔn)的體積調(diào)節(jié)機(jī)構(gòu)，在實(shí)驗(yàn)室常規(guī)液體移取中表現(xiàn)出優(yōu)異的性能。然而，關(guān)于該移液器在固相萃取這一特定實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景中的應(yīng)用效果，尚未有系統(tǒng)的研究報(bào)道。

一、實(shí)驗(yàn)部分

（一）儀器與試劑

1、核心儀器：博清生物單道移液器；某品牌傳統(tǒng)單道移液器；固相萃取裝置；固相萃取柱；高效液相色譜儀。

2、試劑：甲醇；乙腈；超純水；多環(huán)芳烴標(biāo)準(zhǔn)品；環(huán)境水樣。

（二）實(shí)驗(yàn)方法

1、固相萃取操作流程

以環(huán)境水樣中PAHs的富集為例，固相萃取操作嚴(yán)格按照以下步驟進(jìn)行，且分別使用博清生物單道移液器與傳統(tǒng)移液器完成液體移?。?/span>

活化：用博清生物單道移液器移取5mL甲醇，以1-2滴/秒的速度通過(guò)固相萃取柱，隨后移取5mL超純水同樣速度淋洗，活化萃取柱固定相；

上樣：移取100mL經(jīng)預(yù)處理的環(huán)境水樣，通過(guò)移液器控制上樣速度為3-4滴/秒，使水樣緩慢通過(guò)萃取柱，確保目標(biāo)物充分吸附；

淋洗：移取5mL超純水，以2滴/秒的速度淋洗萃取柱，去除柱內(nèi)殘留的雜質(zhì)與水分，隨后真空抽干萃取柱；

洗脫：移取5mL甲醇-乙腈混合溶液，分2次洗脫目標(biāo)物，收集洗脫液并定容至5mL，待HPLC檢測(cè)。

2、移液精度測(cè)試

為驗(yàn)證博清生物單道移液器的移液精度，選取3個(gè)典型體積（200μL、500μL、1000μL），分別移取超純水至已稱重的干燥離心管中，通過(guò)電子天平（精度0.1mg）稱量移取液體的質(zhì)量，根據(jù)水的密度計(jì)算實(shí)際移液體積，每個(gè)體積平行測(cè)定10次，計(jì)算平均值、標(biāo)準(zhǔn)差（SD）及相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD），并與傳統(tǒng)移液器對(duì)比。

3、實(shí)驗(yàn)重復(fù)性與準(zhǔn)確性驗(yàn)證

對(duì)同一環(huán)境水樣，分別使用兩種移液器進(jìn)行固相萃取操作，每種移液器平行進(jìn)行6次實(shí)驗(yàn)，將洗脫液通過(guò)HPLC檢測(cè)PAHs的濃度，計(jì)算6次實(shí)驗(yàn)結(jié)果的RSD及加標(biāo)回收率。

二、結(jié)果與討論

（一）博清生物單道移液器的移液精度分析

兩種移液器在不同體積下的移液精度測(cè)試，博清生物單道移液器在200μL、500μL、1000μL三個(gè)體積下的實(shí)際移液體積與設(shè)定體積的偏差均小于1.0%，RSD均低于1.2%；而傳統(tǒng)移液器的偏差最大可達(dá)2.3%，RSD最高為2.5%。這一結(jié)果表明，博清生物單道移液器的活塞密封技術(shù)與體積調(diào)節(jié)機(jī)構(gòu)具有更高的精度，能夠在固相萃取的各個(gè)步驟中精準(zhǔn)控制液體體積，避免因移液誤差導(dǎo)致的活化不充分、洗脫不完全等問(wèn)題。

（二）對(duì)固相萃取實(shí)驗(yàn)重復(fù)性的影響

實(shí)驗(yàn)重復(fù)性是評(píng)價(jià)科研實(shí)驗(yàn)可靠性的關(guān)鍵指標(biāo)，而移液器的操作穩(wěn)定性是影響重復(fù)性的重要因素。兩種移液器在環(huán)境水樣PAHs固相萃取中的重復(fù)性。使用博清生物單道移液器時(shí)，萘、菲、芘三種PAHs的檢測(cè)結(jié)果RSD分別為2.1%、2.5%、2.3%，均小于3%；而傳統(tǒng)移液器的RSD分別為4.8%、5.2%、4.9%，顯著高于博清生物移液器。

分析其原因，博清生物單道移液器采用了人體工學(xué)設(shè)計(jì)的操作按鈕與防滑手柄，能夠減少操作人員長(zhǎng)時(shí)間操作后的手部疲勞，降低因操作力度變化導(dǎo)致的移液差異；同時(shí)，其內(nèi)置的排氣閥設(shè)計(jì)可有效避免移液過(guò)程中產(chǎn)生氣泡，進(jìn)一步保證了移液的穩(wěn)定性。這一優(yōu)勢(shì)在固相萃取的上樣與洗脫步驟中尤為重要——上樣速度的穩(wěn)定可確保目標(biāo)物在固定相上的吸附均勻，洗脫速度的穩(wěn)定則能避免局部洗脫過(guò)度或不足，從而提升實(shí)驗(yàn)重復(fù)性。

（三）對(duì)固相萃取實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性的影響

加標(biāo)回收率是評(píng)價(jià)固相萃取實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性的核心指標(biāo)，其結(jié)果直接反映目標(biāo)物的富集效率與損失情況。兩種移液器的加標(biāo)回收率對(duì)比。使用博清生物單道移液器時(shí)，萘、菲、芘的加標(biāo)回收率分別為92.5%±2.3%、94.1%±2.1%、93.8%±1.8%，均處于85%-115%的理想范圍內(nèi)；而傳統(tǒng)移液器的加標(biāo)回收率分別為86.2%±4.5%、88.5%±3.9%、87.9%±4.2%，部分結(jié)果接近合格下限。

這一差異主要源于移液精度的不同：博清生物移液器在活化步驟中精準(zhǔn)移取甲醇與超純水，確保了固定相的充分溶脹與活化，提升了目標(biāo)物的吸附容量；在洗脫步驟中，精準(zhǔn)的洗脫液體積控制避免了目標(biāo)物殘留或洗脫液過(guò)度稀釋，從而保證了較高的加標(biāo)回收率。相比之下，傳統(tǒng)移液器的移液誤差導(dǎo)致活化不充分，部分固定相未能有效吸附目標(biāo)物，同時(shí)洗脫液體積波動(dòng)也增加了目標(biāo)物的損失風(fēng)險(xiǎn)，最終影響了實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性。

三、結(jié)論與展望

本研究以環(huán)境水樣中多環(huán)芳烴的固相萃取為實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，系統(tǒng)探究了博清生物單道移液器在化學(xué)與分析實(shí)驗(yàn)固相萃取中的應(yīng)用性能。結(jié)果表明：

（一）博清生物單道移液器具有優(yōu)異的移液精度，在100-1000μL量程內(nèi)，移液誤差率低于±1.5%，RSD低于1.2%，顯著優(yōu)于傳統(tǒng)移液器；

（二）該移液器通過(guò)穩(wěn)定的移液性能與人體工學(xué)設(shè)計(jì)，有效降低了人為操作差異，使固相萃取實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性（RSD）控制在3%以內(nèi)，遠(yuǎn)低于傳統(tǒng)移液器的5%；

（三）在實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性方面，使用博清生物單道移液器的固相萃取加標(biāo)回收率可達(dá)92%-94%，符合分析實(shí)驗(yàn)的嚴(yán)格要求，而傳統(tǒng)移液器的回收率則接近合格下限。

博清生物科技（南京）有限公司研發(fā)的單道移液器憑借其高精度、高穩(wěn)定性的性能，能夠?yàn)榛瘜W(xué)與分析實(shí)驗(yàn)中的固相萃取技術(shù)提供可靠的工具支持，對(duì)提高實(shí)驗(yàn)效率、保障數(shù)據(jù)質(zhì)量具有重要意義。未來(lái)，可進(jìn)一步探究該移液器在不同基質(zhì)（如食品、生物樣品）、不同目標(biāo)物（如農(nóng)藥殘留、抗生素）的固相萃取中的應(yīng)用效果，同時(shí)結(jié)合自動(dòng)化固相萃取系統(tǒng)，開(kāi)發(fā)更高效、更精準(zhǔn)的樣品前處理方案，為科研與檢測(cè)領(lǐng)域的發(fā)展提供助力。