診斷試劑作為生物技術產業(yè)的核心細分領域，在傳染病防控、臨床疾病診斷、食品安全檢測等領域發(fā)揮不可替代作用。核酸提取是診斷試劑生產的首要核心步驟——無論是核酸擴增（PCR）試劑、基因測序試劑，還是核酸等溫擴增試劑，其核心原料（目標核酸模板）的提取質量直接影響試劑的檢測性能：低純度核酸中的蛋白、多糖等雜質會抑制擴增反應，而低效率提取會導致試劑靈敏度不足，批間差異則會降低試劑臨床應用的可靠性。

傳統(tǒng)核酸提取方法（如酚-氯仿法、離心柱法）存在操作繁瑣、耗時久、通量低、人為誤差大等缺陷，難以適應診斷試劑規(guī)?；a的需求。自動化核酸提取儀的出現(xiàn)實現(xiàn)了提取流程的標準化、高通量化，成為診斷試劑生產工藝升級的關鍵設備。博清生物科技（南京）有限公司作為國內生物技術設備領域的創(chuàng)新企業(yè)，其研發(fā)的核酸提取儀基于磁珠法原理，整合高通量通道設計、智能溫控系統(tǒng)及自動化液體處理技術，針對診斷試劑生產的工業(yè)化需求進行優(yōu)化。

一、材料與方法

（一）實驗儀器

博清生物核酸提取儀；實時熒光定量PCR儀；核酸蛋白檢測儀；高速冷凍離心機。

（二）實驗材料與試劑

新冠病毒假病毒顆粒（濃度1×10?copies/mL，國家衛(wèi)健委臨床檢驗中心）；大腸埃希菌（ATCC 25922）、金黃色葡萄球菌（ATCC 29213）標準菌株；臨床血清樣本（100例）；磁珠法核酸提取試劑盒（病毒型、細菌型、全血型）；新冠病毒核酸檢測試劑盒。

（三）實驗設計

1、提取效率與純度評估

分別以新冠病毒假病毒顆粒、大腸埃希菌菌液（1×10?CFU/mL）、臨床血清樣本為研究對象，采用博清生物提取儀進行核酸提取，每個樣本設置3個平行重復，共3批實驗。通過核酸蛋白檢測儀檢測提取核酸的A260/A280比值（評估純度）及A260值（換算濃度，評估效率）；同時以傳統(tǒng)離心柱法為對照，比較兩種方法的提取效果。

2、重復性評估

選取新冠病毒假病毒顆粒（濃度1×10?、1×10?、1×10?copies/mL）3個梯度樣本，采用核酸提取儀進行20次批內提取、5批批間提?。ú煌掌凇⒉煌僮魅藛T），通過實時熒光定量PCR檢測提取核酸的Ct值，計算變異系數(shù)（CV）。

3、診斷試劑生產應用驗證

將核酸提取儀整合入新冠病毒核酸檢測試劑盒生產流程，以1×10?copies/mL的假病毒顆粒為原料，批量提取核酸作為陽性參考品原料，生產3批試劑盒（每批1000人份）。依據(jù)《新型冠狀病毒核酸檢測試劑盒技術審查指導原則》，檢測試劑盒的陽性符合率、陰性符合率、批間差異及穩(wěn)定性。

二、結果

（一）提取效率與純度

博清生物核酸提取儀與傳統(tǒng)離心柱法的提取性能對比結果顯示：兩種儀器提取病毒核酸、細菌核酸及血清樣本核酸的A260/A280比值均在1.8-2.0范圍內，但博清生物核酸提取儀提取核酸濃度平均高出離心柱法12.3%-18.7%；且博清儀器單批提取時間較離心柱法（120縮短75%。

（二）重復性

批內及批間重復性實驗結果顯示：博清生物核酸提取儀對不同濃度假病毒樣本的批內Ct值CV為1.2%-2.3%，批間Ct值CV為2.1%-3.5%，均顯著低于離心柱法（批內CV3.8%-5.2%，批間CV4.9%-6.7%），表明其提取過程穩(wěn)定性優(yōu)異，受人為操作及環(huán)境因素影響小。

（三）診斷試劑生產應用效果

將博清生物核酸提取儀應用于新冠病毒核酸檢測試劑盒生產后，3批試劑盒的質量檢測結果顯示：陽性符合率均為99.2%（124/125），陰性符合率100%（125/125）；批間Ct值差異＜0.5，穩(wěn)定性實驗（4℃存放6個月）顯示試劑性能無顯著下降，各項指標均符合《新型冠狀病毒核酸檢測試劑盒技術審查指導原則》要求。與傳統(tǒng)生產流程相比，采用博清提取儀后，試劑盒生產效率提升60%，人為誤差導致的不合格率從3.2%降至0.8%。

三、討論

診斷試劑生產的核心訴求是“高效、穩(wěn)定、標準化”，而核酸提取環(huán)節(jié)的工藝水平直接決定這三大訴求的實現(xiàn)。博清生物核酸提取儀之所以能顯著提升診斷試劑生產性能，其技術優(yōu)勢主要體現(xiàn)在三方面：一是采用磁珠法特異性結合技術，通過優(yōu)化磁珠表面修飾工藝，提高核酸結合效率，降低雜質殘留，從而提升提取核酸純度；二是高通量自動化設計，16通道并行操作可滿足不同規(guī)模生產需求，自動化液體處理系統(tǒng)避免人為操作差異，保障批間一致性；三是智能溫控與流程優(yōu)化，將裂解、結合、洗滌、洗脫等步驟的溫度與時間參數(shù)進行工業(yè)化適配，縮短提取周期的同時保證提取效率。

在傳染病診斷試劑生產中，如新冠病毒核酸檢測試劑盒，陽性參考品的核酸質量直接影響試劑校準準確性。本研究中，博清提取儀提取的核酸作為參考品原料，使試劑盒陽性符合率穩(wěn)定在99%以上，批間差異顯著降低，證明其可有效保障試劑質量穩(wěn)定性。此外，該儀器適配病毒、細菌、全血、組織等多種樣本類型的提取需求，可靈活應用于呼吸道傳染病、消化道傳染病、遺傳病等各類診斷試劑的生產，具有廣泛的產業(yè)適用性。

與國外同類儀器相比，博清生物科技（南京）有限公司研發(fā)的核酸提取儀在性能相當?shù)那疤嵯拢哂懈叩男詢r比和更靈活的本土化服務，可降低國內診斷試劑企業(yè)的生產成本，提升產業(yè)競爭力。未來，隨著生物技術產業(yè)向“精準化、快速化”發(fā)展，核酸提取儀需進一步優(yōu)化提取通量、縮短提取時間，并與下游擴增、檢測設備實現(xiàn)一體化整合，博清生物科技（南京）有限公司可基于現(xiàn)有技術平臺，開展多模塊集成研發(fā)，為診斷試劑生產提供更完整的解決方案。

博清生物科技（南京）有限公司研發(fā)的核酸提取儀在診斷試劑生產中的應用顯示，其具有提取效率高、純度優(yōu)、重復性好、自動化程度高的特點，可顯著提升診斷試劑生產效率、降低人為誤差、保障試劑質量穩(wěn)定性。該儀器能滿足各類診斷試劑規(guī)?；?、標準化生產的需求，對推動生物技術產業(yè)中診斷試劑領域的工藝升級與質量提升具有重要意義，具備廣闊的市場應用前景。

---

內容來源：http://www.boqinglab.com